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pcr仪使用方法

发布时间:2017-09-18 11:15 | 编辑:pcr仪 | 来源:www. | 8 次浏览
pcr仪具体应如何使用呢?以下小编为您详细说明:(1)向一微量离心管中依次加入dna模板102-105拷贝引物 各1μmol/ldntp各200μmol/l10×pcr缓冲液1/10体积ddh2o补到终体积(终体积50μl-100μl)(1)混匀后,离心15s使反应成分集于管底。以上步骤仅在实验研究用,现在商品化试剂已将dntp、10×pcr缓冲液,引物,ddh2o混合在一起,反应体积为20-25μl,只要试验人员加入处理好的样品就可以了。(2)加石蜡油50-100μl于反应液表面以...

pcr仪具体应如何使用呢?以下小编为您详细说明:

(1)向一微量离心管中依次加入

dna模板102-105拷贝

引物 各1μmol/l

dntp各200μmol/l

10×pcr缓冲液1/10体积

ddh2o补到终体积(终体积50μl-100μl)

(1)混匀后,离心15s使反应成分集于管底。以上步骤仅在实验研究用,现在商品化试剂已将dntp、10×pcr缓冲液,引物,ddh2o混合在一起,反应体积为20-25μl,只要试验人员加入处理好的样品就可以了。

(2)加石蜡油50-100μl于反应液表面以防蒸发。置反应管于97℃变性10min。

(3)冷至延伸温度时,加入1-5u taq dna聚合酶,离心30s使酶和反应液充分混合。现在临床使用试剂酶通常已加入反应液中。

(4)pcr仪的循环程序为:94℃变性30s,55℃退火20s,然后在72℃延伸30s,共循环30-35次。最后一次循环结束后,再将反应管置72℃温育5min,以确保充分延伸。


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